伤寒、副伤寒杆菌抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
使 用 说 明（96T/48T）
[原理]
本试剂盒采用亲和素-生物素化Sp-抗原（A、B、C）预包被板ELISA 原理，检测人血清/血浆中存在的Sp- IgG 抗体，并配以酶标记抗人IgG（h+l链）单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的副伤寒沙门杆菌（Sp）IgG抗体，对伤寒杆菌感染的流行病学调查和追踪传染源有重要的价值，操作优于肥达氏反应，简便、快速、灵敏。
[试剂盒组成]
1、生物素化抗原预包被板 1块（8X12/4X12） 2、阴性对照 1瓶
3、阳性对照 1瓶
4、标本稀释液 1瓶（20 ml/10ml）
5、酶结合物 1瓶（12/5ml）
6、30X浓缩洗液
1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）
7、显示剂A、B液 各1瓶（5/3ml）
8、终止液（2M H2SO4） 1瓶（5/3ml）
9、说明书 1份
[操作步骤]
1、将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板
架上。
2、样本稀释：用标本稀释液以1：101（5ul—500ul）稀释标本，分别加已稀释的待检标本及设阴阳性对照100ul各一孔于反应板中，设空白对照一孔（加100ul标本稀释液），轻拍混匀。
3、37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板 3次并在吸水纸上拍干。
4、加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。
5、显色：每孔加显色剂A、B各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。
[结果判断]
1. 目测：在白色背景下观察各孔显色情况，蓝色者 为阳性，无色者为阴性。
2. 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm 下测定各孔O.D值。
① P/N=标本O.D值/ 阴性对照O.D值。
② P/N≥2.1为阳性；
③ 1.5≤P/N<2.1为可疑标本; P/N<1.5为阴性。
④ 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
⑤ 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。
[注意事项]
1. 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置 室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。
2. 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。
3. 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。
4. 试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。
5. 避免用溶血、混浊或脂血标本。
6. **用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。